ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಜೈವಿಕ ಏಜೆಂಟ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಗಿಬ್ಬೆರೆಲಿಕ್ ಆಮ್ಲವು ಸ್ಟೀವಿಯಾ ಬೆಳವಣಿಗೆ ಮತ್ತು ಸ್ಟೀವಿಯೋಲ್ ಗ್ಲೈಕೋಸೈಡ್ ಉತ್ಪಾದನೆಯ ಮೇಲೆ ಅದರ ಕೋಡಿಂಗ್ ಜೀನ್‌ಗಳನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುವ ಮೂಲಕ ಬೀರುವ ಪರಿಣಾಮಗಳ ಹೋಲಿಕೆ.

ವಿಶ್ವ ಮಾರುಕಟ್ಟೆಗಳಲ್ಲಿ ಕೃಷಿ ಅತ್ಯಂತ ಪ್ರಮುಖ ಸಂಪನ್ಮೂಲವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಪರಿಸರ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳು ಅನೇಕ ಸವಾಲುಗಳನ್ನು ಎದುರಿಸುತ್ತವೆ. ರಾಸಾಯನಿಕ ಗೊಬ್ಬರಗಳ ಜಾಗತಿಕ ಬಳಕೆ ಬೆಳೆಯುತ್ತಿದೆ ಮತ್ತು ಬೆಳೆ ಇಳುವರಿಯಲ್ಲಿ ಪ್ರಮುಖ ಪಾತ್ರ ವಹಿಸುತ್ತದೆ1. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಈ ರೀತಿಯಲ್ಲಿ ಬೆಳೆದ ಸಸ್ಯಗಳು ಸರಿಯಾಗಿ ಬೆಳೆಯಲು ಮತ್ತು ಪಕ್ವವಾಗಲು ಸಾಕಷ್ಟು ಸಮಯವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವುದಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ಆದ್ದರಿಂದ ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಸಸ್ಯ ಗುಣಗಳನ್ನು ಪಡೆಯುವುದಿಲ್ಲ2. ಇದರ ಜೊತೆಗೆ, ಮಾನವ ದೇಹ ಮತ್ತು ಮಣ್ಣಿನಲ್ಲಿ ಬಹಳ ಹಾನಿಕಾರಕ ವಿಷಕಾರಿ ಸಂಯುಕ್ತಗಳು ಸಂಗ್ರಹವಾಗಬಹುದು3. ಆದ್ದರಿಂದ, ರಾಸಾಯನಿಕ ಗೊಬ್ಬರಗಳ ಅಗತ್ಯವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಲು ಪರಿಸರ ಸ್ನೇಹಿ ಮತ್ತು ಸುಸ್ಥಿರ ಪರಿಹಾರಗಳನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸುವ ಅವಶ್ಯಕತೆಯಿದೆ. ಪ್ರಯೋಜನಕಾರಿ ಸೂಕ್ಷ್ಮಜೀವಿಗಳು ಜೈವಿಕವಾಗಿ ಸಕ್ರಿಯವಾಗಿರುವ ನೈಸರ್ಗಿಕ ಸಂಯುಕ್ತಗಳ ಪ್ರಮುಖ ಮೂಲವಾಗಬಹುದು4.
ಎಲೆಗಳಲ್ಲಿರುವ ಎಂಡೋಫೈಟಿಕ್ ಸಮುದಾಯಗಳು ಆತಿಥೇಯ ಸಸ್ಯ ಪ್ರಭೇದಗಳು ಅಥವಾ ಜೀನೋಟೈಪ್, ಸಸ್ಯ ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ಹಂತ ಮತ್ತು ಸಸ್ಯ ರೂಪವಿಜ್ಞಾನವನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿ ಬದಲಾಗುತ್ತವೆ. 13 ಅಜೋಸ್ಪಿರಿಲ್ಲಮ್, ಬ್ಯಾಸಿಲಸ್, ಅಜೋಟೋಬ್ಯಾಕ್ಟರ್, ಸ್ಯೂಡೋಮೊನಾಸ್ ಮತ್ತು ಎಂಟರೊಬ್ಯಾಕ್ಟರ್‌ಗಳುಸಸ್ಯಗಳ ಬೆಳವಣಿಗೆಯನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸಿ. 14 ಇದಲ್ಲದೆ, ಸಸ್ಯಗಳ ಬೆಳವಣಿಗೆ ಮತ್ತು ಇಳುವರಿಯನ್ನು ಸುಧಾರಿಸುವ ವಿಷಯದಲ್ಲಿ ಬ್ಯಾಸಿಲಸ್ ಮತ್ತು ಅಜೋಸ್ಪಿರಿಲ್ಲಮ್ ಹೆಚ್ಚು ತೀವ್ರವಾಗಿ ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಲಾದ PGPB ಕುಲಗಳಾಗಿವೆ. 15 ದ್ವಿದಳ ಧಾನ್ಯಗಳಲ್ಲಿ ಅಜೋಸ್ಪಿರಿಲ್ಲಮ್ ಬ್ರೆಸಿಲಿಯೆನ್ಸಿಸ್ ಮತ್ತು ಬ್ರಾಡಿರಿಜೋಬಿಯಂನ ಸಹ-ಇನಾಕ್ಯುಲೇಷನ್ ಮೆಕ್ಕೆಜೋಳ, ಗೋಧಿ, ಸೋಯಾಬೀನ್ ಮತ್ತು ಕಿಡ್ನಿ ಬೀನ್‌ಗಳ ಇಳುವರಿಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ಅಧ್ಯಯನಗಳು ತೋರಿಸಿವೆ. 16, 17 ಬ್ಯಾಸಿಲಸ್ ಲೈಕೆನಿಫಾರ್ಮಿಸ್ ಮತ್ತು ಇತರ PGPB ಗಳೊಂದಿಗೆ ಸ್ಯಾಲಿಕಾರ್ನಿಯಾದ ಇನಾಕ್ಯುಲೇಷನ್ ಸಸ್ಯಗಳ ಬೆಳವಣಿಗೆ ಮತ್ತು ಪೋಷಕಾಂಶಗಳ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯನ್ನು ಸಿನರ್ಜಿಸ್ಟಿಕಲ್ ಆಗಿ ಉತ್ತೇಜಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ಅಧ್ಯಯನಗಳು ತೋರಿಸಿವೆ. 18 ಅಜೋಸ್ಪಿರಿಲ್ಲಮ್ ಬ್ರೆಸಿಲಿಯೆನ್ಸಿಸ್ Sp7 ಮತ್ತು ಬ್ಯಾಸಿಲಸ್ ಸ್ಫೇರಿಕಸ್ UPMB10 ಸಿಹಿ ಬಾಳೆಹಣ್ಣಿನ ಬೇರಿನ ಬೆಳವಣಿಗೆಯನ್ನು ಸುಧಾರಿಸುತ್ತದೆ. ಅದೇ ರೀತಿ, ಕಳಪೆ ಸಸ್ಯಕ ಬೆಳವಣಿಗೆ ಮತ್ತು ಕಡಿಮೆ ಮೊಳಕೆಯೊಡೆಯುವಿಕೆಯಿಂದಾಗಿ, ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಬರ ಒತ್ತಡದ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ, ಫೆನ್ನೆಲ್ ಬೀಜಗಳನ್ನು ಬೆಳೆಯುವುದು ಕಷ್ಟ. ಸ್ಯೂಡೋಮೊನಾಸ್ ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ಮತ್ತು ಟ್ರೈಕೊಡರ್ಮಾ ಹಾರ್ಜಿಯಾನಮ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಬೀಜ ಸಂಸ್ಕರಣೆಯು ಬರ ಒತ್ತಡದ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ಫೆನ್ನೆಲ್ ಮೊಳಕೆಗಳ ಆರಂಭಿಕ ಬೆಳವಣಿಗೆಯನ್ನು ಸುಧಾರಿಸುತ್ತದೆ 21. ಸ್ಟೀವಿಯಾಕ್ಕೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದಂತೆ, ಮೈಕೋರೈಜಲ್ ಶಿಲೀಂಧ್ರಗಳು ಮತ್ತು ಸಸ್ಯಗಳ ಬೆಳವಣಿಗೆಯನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸುವ ರೈಜೋಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ (PGPR) ಜೀವಿಗಳ ಬೆಳವಣಿಗೆ, ದ್ವಿತೀಯಕ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸುವುದು ಮತ್ತು ಜೈವಿಕ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯಲ್ಲಿ ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಜೀನ್‌ಗಳನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯದ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಲು ಅಧ್ಯಯನಗಳನ್ನು ನಡೆಸಲಾಗಿದೆ. ರಾಹಿ ಮತ್ತು ಇತರರು 22 ರ ಪ್ರಕಾರ, ವಿಭಿನ್ನ PGPR ಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಸಸ್ಯಗಳ ಇನಾಕ್ಯುಲೇಷನ್ ಅವುಗಳ ಬೆಳವಣಿಗೆ, ದ್ಯುತಿಸಂಶ್ಲೇಷಕ ಸೂಚ್ಯಂಕ ಮತ್ತು ಸ್ಟೀವಿಯೋಸೈಡ್ ಮತ್ತು ಸ್ಟೀವಿಯೋಸೈಡ್ A ಯ ಸಂಗ್ರಹಣೆಯನ್ನು ಸುಧಾರಿಸಿದೆ. ಮತ್ತೊಂದೆಡೆ, ಸಸ್ಯಗಳ ಬೆಳವಣಿಗೆಯನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸುವ ರೈಜೋಬಿಯಾ ಮತ್ತು ಆರ್ಬಸ್ಕುಲರ್ ಮೈಕೋರೈಜಲ್ ಶಿಲೀಂಧ್ರಗಳೊಂದಿಗೆ ಸ್ಟೀವಿಯಾ ಇನಾಕ್ಯುಲೇಷನ್ ಸಸ್ಯದ ಎತ್ತರ, ಸ್ಟೀವಿಯೋಸೈಡ್, ಖನಿಜ ಮತ್ತು ವರ್ಣದ್ರವ್ಯದ ವಿಷಯಗಳನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ಒವಿಯೆಡೊ-ಪೆರೇರಾ ಮತ್ತು ಇತರರು 24 ವರದಿ ಮಾಡಿದ್ದಾರೆ. ಉದ್ರೇಕಕಾರಿ ಎಂಡೋಫೈಟ್‌ಗಳು ಎಂಟರೊಬ್ಯಾಕ್ಟರ್ ಹಾರ್ಮೆಚೆ H2A3 ಮತ್ತು H5A2 SG ಅಂಶವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಿವೆ, ಎಲೆಗಳಲ್ಲಿ ಟ್ರೈಕೋಮ್ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸಿವೆ ಮತ್ತು ಟ್ರೈಕೋಮ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಮೆಟಾಬಾಲೈಟ್‌ಗಳ ಸಂಗ್ರಹವನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸಿವೆ, ಆದರೆ ಅವು ಸಸ್ಯ ಬೆಳವಣಿಗೆಯನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸಲಿಲ್ಲ;
GA3 ಅತ್ಯಂತ ಪ್ರಮುಖ ಮತ್ತು ಜೈವಿಕವಾಗಿ ಸಕ್ರಿಯವಾಗಿರುವ ಗಿಬ್ಬೆರೆಲಿನ್ ತರಹದ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದಾಗಿದೆ31. GA3 ನೊಂದಿಗೆ ಸ್ಟೀವಿಯಾದ ಬಾಹ್ಯ ಚಿಕಿತ್ಸೆಯು ಕಾಂಡದ ಉದ್ದ ಮತ್ತು ಹೂಬಿಡುವಿಕೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ32. ಮತ್ತೊಂದೆಡೆ, ಕೆಲವು ಅಧ್ಯಯನಗಳು GA3 ಒಂದು ಪ್ರಚೋದಕವಾಗಿದ್ದು, ಉತ್ಕರ್ಷಣ ನಿರೋಧಕಗಳು ಮತ್ತು ವರ್ಣದ್ರವ್ಯಗಳಂತಹ ದ್ವಿತೀಯಕ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲು ಸಸ್ಯಗಳನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಇದು ರಕ್ಷಣಾ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವಾಗಿದೆ33 ಎಂದು ವರದಿ ಮಾಡಿದೆ.
ಇತರ ತಳಿ ಪ್ರಕಾರಗಳಿಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದಂತೆ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಗಳ ಫೈಲೋಜೆನೆಟಿಕ್ ಸಂಬಂಧಗಳು. ಜೆನ್‌ಬ್ಯಾಂಕ್ ಪ್ರವೇಶ ಸಂಖ್ಯೆಗಳನ್ನು ಆವರಣದಲ್ಲಿ ನೀಡಲಾಗಿದೆ.
ಅಮೈಲೇಸ್, ಸೆಲ್ಯುಲೇಸ್ ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟಿಯೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಗಳನ್ನು ವಸಾಹತುಗಳ ಸುತ್ತಲೂ ಸ್ಪಷ್ಟ ಪಟ್ಟಿಗಳಾಗಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ, ಆದರೆ ವಸಾಹತುಗಳ ಸುತ್ತಲಿನ ಬಿಳಿ ಅವಕ್ಷೇಪಗಳು ಲಿಪೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತವೆ. ಕೋಷ್ಟಕ 2 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವಂತೆ, ಬಿ. ಪ್ಯಾರಾಮೈಕಾಯ್ಡ್‌ಗಳು SrAM4 ಎಲ್ಲಾ ಹೈಡ್ರೋಲೇಸ್‌ಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಬಹುದು, ಆದರೆ ಬಿ. ಪ್ಯಾರಾಲಿಚೆನಿಫಾರ್ಮಿಸ್ SrMA3 ಸೆಲ್ಯುಲೇಸ್ ಹೊರತುಪಡಿಸಿ ಎಲ್ಲಾ ಕಿಣ್ವಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಬಹುದು ಮತ್ತು ಬಿ. ಲೈಕೆನಿಫಾರ್ಮಿಸ್ SrAM2 ಸೆಲ್ಯುಲೇಸ್ ಅನ್ನು ಮಾತ್ರ ಉತ್ಪಾದಿಸುತ್ತದೆ.
ಔಷಧೀಯ ಮತ್ತು ಆರೊಮ್ಯಾಟಿಕ್ ಸಸ್ಯಗಳಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿದ ದ್ವಿತೀಯಕ ಮೆಟಾಬೊಲೈಟ್ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯೊಂದಿಗೆ ಹಲವಾರು ಪ್ರಮುಖ ಸೂಕ್ಷ್ಮಜೀವಿಯ ಕುಲಗಳು ಸಂಬಂಧ ಹೊಂದಿವೆ74. ನಿಯಂತ್ರಣಕ್ಕೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ S. rebaudiana Shou-2 ನಲ್ಲಿ ಎಲ್ಲಾ ಕಿಣ್ವಕ ಮತ್ತು ಕಿಣ್ವಕವಲ್ಲದ ಉತ್ಕರ್ಷಣ ನಿರೋಧಕಗಳು ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಾದವು. ಅಕ್ಕಿಯಲ್ಲಿ TPC ಯ ಮೇಲೆ PGPB ಯ ಸಕಾರಾತ್ಮಕ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು Chamam et al.75 ವರದಿ ಮಾಡಿದೆ; ಇದಲ್ಲದೆ, ನಮ್ಮ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು S. rebaudiana ನಲ್ಲಿ TPC, TFC, ಮತ್ತು DPPH ನ ಫಲಿತಾಂಶಗಳೊಂದಿಗೆ ಸ್ಥಿರವಾಗಿವೆ, ಇದು Piriformospora indica ಮತ್ತು Azotobacter chroococcum76 ನ ಸಂಯೋಜಿತ ಕ್ರಿಯೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗಿದೆ. ಸಂಸ್ಕರಿಸದ ಸಸ್ಯಗಳಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಸೂಕ್ಷ್ಮಜೀವಿಗಳೊಂದಿಗೆ ಚಿಕಿತ್ಸೆ ಪಡೆದ ತುಳಸಿ ಸಸ್ಯಗಳಲ್ಲಿ TPC ಮತ್ತು TFC77 ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿವೆ. ಇದಲ್ಲದೆ, ಉತ್ಕರ್ಷಣ ನಿರೋಧಕಗಳ ಹೆಚ್ಚಳವು ಎರಡು ಕಾರಣಗಳಿಗಾಗಿ ಸಂಭವಿಸಬಹುದು: ಸಸ್ಯವು ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ವಸಾಹತುಶಾಹಿಗೆ ಹೊಂದಿಕೊಳ್ಳುವವರೆಗೆ ರೋಗಕಾರಕ ಸೂಕ್ಷ್ಮಜೀವಿಗಳಂತೆಯೇ ಜಲವಿಚ್ಛೇದಕ ಕಿಣ್ವಗಳು ಪ್ರೇರಿತ ಸಸ್ಯ ರಕ್ಷಣಾ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸುತ್ತವೆ78. ಎರಡನೆಯದಾಗಿ, PGPB ಉನ್ನತ ಸಸ್ಯಗಳು ಮತ್ತು ಸೂಕ್ಷ್ಮಜೀವಿಗಳಲ್ಲಿ ಶಿಕಿಮೇಟ್ ಮಾರ್ಗದ ಮೂಲಕ ರೂಪುಗೊಂಡ ಜೈವಿಕ ಸಕ್ರಿಯ ಸಂಯುಕ್ತಗಳ ಪ್ರಚೋದನೆಯ ಪ್ರಾರಂಭಕವಾಗಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸಬಹುದು 79.
ಬಹು ತಳಿಗಳನ್ನು ಸಹ-ಇನಾಕ್ಯುಲೇಷನ್ ಮಾಡಿದಾಗ ಎಲೆಗಳ ಸಂಖ್ಯೆ, ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಮತ್ತು SG ಉತ್ಪಾದನೆಯ ನಡುವೆ ಸಹಕ್ರಿಯೆಯ ಸಂಬಂಧವಿದೆ ಎಂದು ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ತೋರಿಸಿವೆ. ಮತ್ತೊಂದೆಡೆ, ಸಸ್ಯ ಬೆಳವಣಿಗೆ ಮತ್ತು ಉತ್ಪಾದಕತೆಯ ವಿಷಯದಲ್ಲಿ ಡಬಲ್ ಇನಾಕ್ಯುಲೇಷನ್ ಏಕ ಇನಾಕ್ಯುಲೇಷನ್‌ಗಿಂತ ಉತ್ತಮವಾಗಿದೆ.
ಸೂಚಕ ತಲಾಧಾರವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಅಗರ್ ಮಾಧ್ಯಮದ ಮೇಲೆ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾವನ್ನು ಇನಾಕ್ಯುಲೇಷನ್ ಮಾಡಿದ ನಂತರ ಮತ್ತು 2-5 ದಿನಗಳವರೆಗೆ 28 ​​°C ನಲ್ಲಿ ಕಾವುಕೊಟ್ಟ ನಂತರ ಹೈಡ್ರೊಲೈಟಿಕ್ ಕಿಣ್ವಗಳನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲಾಯಿತು. ಪಿಷ್ಟ ಅಗರ್ ಮಾಧ್ಯಮದ ಮೇಲೆ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾವನ್ನು ಲೇಪಿಸಿದ ನಂತರ, ಅಯೋಡಿನ್ 100 ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಅಮೈಲೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಯಿತು. ಕಿಯಾನ್‌ಗಮ್ ಮತ್ತು ಇತರರು 101 ರ ವಿಧಾನದ ಪ್ರಕಾರ 0.2% ಜಲೀಯ ಕಾಂಗೋ ಕೆಂಪು ಕಾರಕವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಸೆಲ್ಯುಲೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಯಿತು. ಕುಯಿ ಮತ್ತು ಇತರರು ವಿವರಿಸಿದಂತೆ ಕೆನೆರಹಿತ ಹಾಲಿನ ಅಗರ್ ಮಾಧ್ಯಮದ ಮೇಲೆ ಲೇಪಿತ ವಸಾಹತುಗಳ ಸುತ್ತಲಿನ ಸ್ಪಷ್ಟ ವಲಯಗಳ ಮೂಲಕ ಪ್ರೋಟೀಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಗಮನಿಸಲಾಯಿತು. 102. ಮತ್ತೊಂದೆಡೆ, ಟ್ವೀನ್ ಅಗರ್ ಮಾಧ್ಯಮದ ಮೇಲೆ ಇನಾಕ್ಯುಲೇಷನ್ ಮಾಡಿದ ನಂತರ ಲಿಪೇಸ್ 100 ಅನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲಾಯಿತು.